食品中油溶性色素速测盒-苏丹红快速检测试剂盒

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苏丹红等油溶性非食用色素的快速检测
（苏丹红等油溶性非食用色素速测盒使用说明）
方法编号：CDC-2041
1 适用范围：本方法适用于苏丹红（1、2、3、4号）等油溶性非食用色素的现场快速检测。
2 方法原理：根据苏丹红等油溶性非食用色素的化学极性不同，通过展开剂在试纸上的展开距离不同来确定确定组分的存在。
3 检测试材（试剂盒组成）：快速层析纸，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号系列苏丹红对照液，展开剂，毛细管。
4 样品处理：取约1g样品于容器中，加入2～4 mL乙酸乙酯，充分震荡1分钟以上，静置3分钟以上。
5 点样：取一张层析纸，在端底向上约1cm处、平行相隔约1cm、用铅笔画出将要点样的+字线或五个小点。取1支毛细管沾取样品溶液的上层液，将其分别点在五个+字线上（样品溶液颜色较浅时，可在每次点样斑点挥干后重复点样），斑点直径控制在5毫米以内。另取四支毛细管分别沾取苏丹红1、2、3、4号对照液少许分别点在样品的原点上。
6 展开：取一个250mL以上的烧杯，加入约5mL展开剂，将层析纸（样品端朝下）插入展开剂中靠在杯壁上，待展开剂延层析纸向上平行展开至层析纸顶端约1厘米处时取出层析纸，观察结果。
7 结果判断
7.1在本实验条件下，如果样品在展开轨迹中出现斑点，其斑点展开（向上跑）的距离与某一对照液展开后的斑点距离相等、颜色相同或颜色虽浅却相近时，即可判断样品中含有这一色素。
7.2我国允许使用的色素除天然色素外没有油溶性色素，天然色素的化学极性往往很小，样品中即使含有天然色素，展开后的色斑会在前沿之处出现淡色斑点或淡色条带。
7.3如果对照物已经展开，而样品色斑在原处未动或展开的距离很小，表明这一色素为水溶性色素，可用水溶性色素检测试剂来判断其是食用的还是非食用的。
8 注意事项：
8.1本方法检出限为点样量10 µL,0.08µg 目视可见；*低检出浓度8µg/mL。精确定量需要采用高效液相色谱仪。
8.2 检测的样品数量较多时，不必每张层析纸上都点对照液，可一次点几个样品，当展开过程中出现斑点后，再做加入对照液实验。 
8.3 苏丹红对照液的点样量不要太多，以能够展现斑点而无拖尾现象为宜。   
8.4 展开剂的使用应适量，液面高度应控制在斑点以下，展开过程中层析纸不能倾倒，每展一张层析纸*好更换一次展开剂。  
8.5 样品展开时，烧杯上不要盖盖，以便于斑点的展开。当环境温度较低，斑点展开的距离较短；或环境温度较高，展开剂展开到层析纸一半距离不再往上展时，应重新操作并在烧杯上加盖物品。
8.6 如果对照物展开后全部堆积到展开前沿处或原点处为移动，说明试剂或操作有问题，应查明原因重新操作。
9 试剂质量控制：将苏丹红系列对照液在试纸上按产品说明展开，应明显区分出不同的展开距离，否则试剂不可再用。
10 产品储藏与效期：试剂闭光常温保存，有效期为1年。
 
      
 苏丹红等油溶性非食用色素快速检测方法注解
1 检测意义：
苏丹红事件在国际与国内都带来较大的影响。国内在多类食品中检测出苏丹红。依据欧盟辣椒粉中苏丹红的检出量和辣椒粉的可能摄入量进行的危险性评估，如果食品中的苏丹红含量很低（仅几毫克），则即使按*坏的假说即*大可能摄入的食品来进行评估，苏丹红诱发动物肿瘤的剂量是人体*大可能摄入量的10万～100万倍，则对人体的致癌可能性极小。但如果食品中的苏丹红含量较高，达上千毫克，则苏丹红诱发动物肿瘤的剂量就是人体*大可能摄入量的100～10000倍。
   由于实际在辣椒粉中苏丹红的检出量通常较低，因此对人健康造成危害的可能性很小，偶然摄入含有少量苏丹红的食品，引起的致癌性危险性不大，但如果经常摄入含较高剂量苏丹红的食品就会增加其致癌的危险性，特别是由于苏丹红有些代谢产物是人类可能致癌物，目前对这些物质尚没有耐受摄入量，因此应尽可能避免摄入这些物质。基于苏丹红是一种人工合成色素，在食品中非天然存在，有致癌性，因此在食品中应禁用，并对我国人群可能的摄入量进行评估。
苏丹红属于油溶性非食用色素，即在油性介质中才能溶解的物质。属于油溶性非食用色素的物质还有许多，
2 检测原理、所用试材、操作方法、结果判断、注意事项与质量控制：详见方法所述。
3方法来源:
本方法由中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、吉林省疾病预防控制中心、山东省疾病预防控制中心、河北省疾病预防控制中心负责起草。
4.1吉林省疾病预防控制中心
4.1.1按产品说明书操作，80µg/mL的苏丹红Ⅰ号对照液点样量10µL , 0.08µg 目视可见；*低检出浓度8µg/mL。
4.1.2加标回收实验采取在样品点样点上加标观察，加标量为10µL，0.08µg时目视可见阳性结果。
4.1.3样品中含有苏丹红时，样品在展开轨迹中出现斑点，其斑点展开（向上跑的距离与某一对照液展开的斑点）距离相等。按取样量10µL计算*低检出浓度8µg/mL。
4.1.4正常食品的反应结果为无斑点展开现象。
4.1.5红色辣椒（秋天自家晾晒）与正常食品的反应结果相同。
4.2山东省疾病预防控制中心
4.2.1按产品说明书操作，80µg/mL的苏丹红Ⅰ号对照液点样量10µL , 0.08µg目视可见；*低检出浓度8µg/mL。
4.2.2加标回收实验采取在样品点样点上加标观察，加标量为10µL，0.08µg时目视可见阳性结果。
4.3河北省疾病预防控制中心         
4.3.1按产品说明书操作测定九个样品，分别为2个辣椒油，3个辣椒粉，4个辣椒酱。取约1g样品于容器中，加入2 mL乙酸乙酯，充分混匀，提取1min，静置3min以上。取样品提取液10µL，混匀，点样，展开。九个样品提取液测定结果为阴性。
4.3.2加标回收实验采取在样品点样点上加标观察，加标量为10µL，0.08µg时目视可见阳性结果。
4.3.3加标回收实验采取与样品提取液混匀后再点样，目视可见弱阳性，
4.3.4 在样品点样点上加标对照与在样品提取液中加标对照虽然都显阳性反应，由于两者溶质的比例有些差异，可导致物质虽然相同而斑点展开的距离（R_f值）有些不同，因此定性不以R_f值表示，而以加标展开的实际距离及色斑颜色的相近程度来确定。