黄曲霉毒素B1速测卡

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黄曲霉毒素B₁检测试纸卡使用说明书
方法编号：CDC-5512
1. 适用范围与检测意义：本品适用于谷物、饲料、食用油、调料和发酵酒等物质中黄曲霉毒素B₁（Aflatoxin B₁简写为AFB₁）的快速检测。黄曲霉毒素B₁是目前已知的化学物质中致癌性很强的一种，对人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。黄曲霉毒素B₁是大部分食品的必检项目之一。
2. 测定原理：本品采用高度特异性抗体抗原反应及免疫层析分析技术，通过单克隆抗体竞争结合AFB₁-BSA偶联物和样品中可能含有的AFB₁的原理。试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的AFB₁-BSA偶联物和被胶体金标记的抗AFB₁单克隆抗体。检出限为5ng/ml。
3. 所用器皿：常量天平±0.1g；蒸发皿或烧杯；量筒；滴管；移液管；小型粉碎机；离心机等。
4. 样品制备：
4.1 谷物与饲料：取5g以上有代表性样品并充分粉碎，准确称取2.0g均匀试样于配套离心管中，向离心管中准确加入2ml纯净水和8.0ml的乙酸乙酯，将瓶塞盖紧密封，充分振荡5min，4000rpm离心1分钟，将上清液用吸管吸出2.0ml到小玻璃杯中，用电吹风吹干液体，考虑不同样品对黄曲霉毒素B1的*高含量要求，可参考下表用稀释液溶解杯底固体，用铝箔袋内配套吸管反复冲洗，彻底溶解杯底所有的固体，此溶解液即为样品检测液。

谷物中残留限量（ppb）	5	10	20	30	40	50	100
使用稀释液体积（ml）	０.４	０.８	１.６	２.４	３.２	４	８
稀释液滴瓶滴数（滴）	8	16	32	48	64	80	160

4.2 食用油：称取2.0g油样于小烧杯中，用8ml正己烷分次将试样转移至分液漏斗中，准确加入4ml纯净水充分振荡3min,吸去上层正己烷层,再加入4ml的乙酸乙酯，将瓶塞盖紧密封，充分振荡5min，静置或离心得上清液，将上清液吸出2ml到小玻璃杯中，用电吹风吹干，参照表格，根据残留限量量取相应体积稀释液复溶杯底固体。此溶解液即为检测液。

食用油中残留限量（ppb）	5	10	20	30	40	50	100
使用稀释液体积（ml）	0.6	1.2	2.4	3.6	4.8	6.0	12.0
稀释液滴瓶滴数（滴）	12	24	48	72	96	120	240

4.3 酱油、醋：准确量取2.0ml样品于15ml离心管中，准确加入4.0ml乙酸乙脂，塞紧瓶塞后充分震荡5min，静置1~2min，待溶液分层以后将上清夜用移液枪（或移液管，吸管）全部转移到另一只15ml离心管中，加入2.0ml 0.05M Na₂CO3溶液，充分震荡3min，用吸管取2mL上清液到小玻璃杯中，吹干滤液，参照表格，根据残留限量量取相应体积稀释液复溶杯底固体。此溶解液即为检测液。

酱油、醋中残留限量（ppb）	5	10	20	30	40	50	100
使用稀释液体积（ml）	1.0	2.0	4.0	6.0	8.0	10	20
稀释液滴瓶滴数（滴）	20	40	80	120	160	200	400

4.3  发酵酒：准确量取2.0ml样品于15ml离心管中，准确加入4.0ml乙酸乙脂，塞紧瓶塞后充分震荡5min，静置1~2min，待溶液分层以后用吸管取2mL上清液到小玻璃杯中，吹干滤液，参照食用油样品制备表格，根据残留限量量取相应体积稀释液复溶杯底固体。此溶解液即为检测液。
5 测定
5.1 使用前将试纸卡和待检样本溶液恢复至室温。
5.2 从原包装袋中取出试纸卡，打开后平放在桌面上，在1小时内尽快地使用。
5.3 用滴管吸取待检样品溶液，滴加3滴于加样孔中，加样后开始计时。
5.4 结果应在5min时读取，超过10min的时间判读无效。
6 结果判定
6.1 阳性：C线显示出红色线条，T线不显色，或C线显示出红色线条，而T线颜色非常模糊时，判为阳性。表明：AFB1含量超过样品允许量。
6.2 阴性：C线显示出红色线条，T线同时显示出红色线条，且T线颜色接近C线或者深于C线时，判为阴性。表明：AFB1含量低于样品允许量。
6.3 无效：C线不显示出红色线条，而T线显示出红色线条，该试纸卡判为无效。建议使用新的试纸卡重新测试。
7 说明
7.1 勿触摸试纸显示区。
7.2 发现过期，破损，污染时不可再用。
7.3 本品应保存在干燥阴凉处（4-30℃），有效期18个月，生产日期见包装。
7.4 本品为一次性产品，勿重复使用。
7.5 如遇稀释液不足，可用蒸馏水加入稀释液中混匀后使用。
7.6 本品为筛选方法，任何阳性结果请用其它方法作进一步确认。
7.7 有条件的实验室可以用AFB1标准品作为判断参考。
8 包装：试纸卡5片，稀释液1瓶，15ml离心管1支。